Se llaman rollovers.
Puedes hacer las dos en el mismo archivo, en diferente capa obviamente, entonces en Image Ready le das propiedades de rollover, cuando lo salves para web solito te va a generar el HTML solo lo copias y lo pegas en tu editor de HTML o a mano peluda y un folder que lo autonombra images.
Sólo asegurate de poner la imágenes en el mismo folder del que sean llamados tanto en tu PC como en tu WEB.
Si necesitas más informacion, puedes visitar
http://byerror.com y hay tutoriales para ello, de hecho si le das una buscadita aquí mismo bajo rollovers seguro sale, te digo porque yo pregunté lo mismo hace ya un rato.
Saludos