Primero hay que hacer click en
"Guardar para Web" y trabajar en ese cuadro de diálogo
Cita: Asignar colores a transparencia
Puede añadir transparencia a una imagen optimizada asignando los colores existentes a transparencia.
Para asignar los colores a transparencia:
1. Seleccione uno o más colores de la imagen optimizada o tabla de colores.
2. Realice una de las acciones siguientes:
* Haga clic en el botón para asignar transparencia Botón Bloquear transparencia de la paleta Tabla de colores.
* Elija Hacer corresponder los colores seleccionados con el transparente en el menú de la paleta Tabla de colores.
La cuadrícula de transparencia Cuadrícula de transparencia aparece en medio de cada color asignado. El cuadrado pequeño situado en la esquina inferior derecha de la muestra de color indica que el color está bloqueado.
Para restaurar la transparencia a sus colores originales:
Realice una de las acciones siguientes:
* Seleccione los colores que desea restaurar y haga clic en el botón para asignar transparencia Botón Bloquear transparencia o elija Anular la correspondencia de los colores seleccionados del transparente en el menú de la paleta Tabla de colores.
* Para restaurar todos los colores asignados a transparencia, elija Anular la correspondencia de todos los colores transparentes.
Tomado del archivo de Ayuda de Photoshop (F1).