Hola.. si estás utilizando boundcolumns.. dentro de tu datagrid... te colocas en el boundcoulmn que deseas asignarle el ancho... y te quedaría algo como ésto:
...
..
<Columns>
<asp:BoundColumn DataField="tu_campo" HeaderText="Título">
<HeaderStyle Width="100px"></HeaderStyle>
</asp:BoundColumn>
..
...
Saludos y suerte...
